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抗体

又称免疫球蛋白 (Ig),是一种能特异性结合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染动物体内引发抗体产生的物质。
根据Y形结构的数量和重链种类的不同,哺乳动物体内的抗体可以分为 5 类:IgG、IgM、IgA、IgD、IgE,它们的重链分别是γ、μ、α、 δ、ε。



 
常见名词
  • 抗原表位 蛋白质表面部分可以使免疫系统产生抗体的区域。一般抗原表位是由6-12个氨基酸或碳水基团组成,它可以是由连续序列组成(连续性抗原表位)或由不连续的蛋白质三维结构组成(构想型抗原表位)。
  • 重链 哺乳动物 Ig 的重链一共有五种,分别用希腊字母α、δ、ε、γ和 μ 来命名,相对应组成的抗体就称为 IgA、IgD、IgE、IgG 和IgM 五种抗体。
  • 轻链 λ型和κ型,每条轻链有两个前后相连的结构域:一个恒定区和一个可变区。
  • Fc 段 可以直接结合酶或荧光染料来标记抗体,是在 ELISA 过程中抗体铆钉在板上的部位,也是在免疫沉淀、免疫印迹和免疫组化中识别并结合二抗的部位。
  • Fab 段 通常用于功能性研究中的放射性标记。
  • 克隆号 是指定给单克隆杂交瘤细胞产生的抗体的编号。每个杂交瘤细胞克隆产生单个纯同质型抗体。
    
多克隆抗体/单克隆抗体

多克隆抗体

单克隆抗体

识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。
多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。
通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。
与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。
免疫动物可以是山羊,兔,绵羊,牛和驴。

仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体。
单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位
免疫动物后选出一个制造一种专一抗体的淋巴细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。
单克隆抗体由小鼠,大鼠,兔和仓鼠细胞产生。
比多克隆抗体生产更复杂。

常见实验应用简写
  • ICC/IF:Immunocytochemistry/ Immunofluorescence (细胞免疫化学/ 细胞免疫荧光)
  • IHC-P: Immunohistochemistry (Formalin/PFA-fixed paraffin-embedded sections) (福尔马林/多聚甲醛固定石蜡包埋组织免疫化学)
  • IHC-Fr: Immunohistochemistry (Frozen sections) (冰冻切片组织免疫化学/免疫荧光)
  • IHC-FoFr :Immunohistochemistry (PFA perfusion fixed frozen sections) (多聚甲醛灌注固定冰冻切片免疫化学/免疫荧光)
  • sELISA: Sandwich ELISA (夹心法酶联免疫吸附)
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